巩义予华

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体外抗氧化活性分析!!!

返回列表 来源:未知 发布日期:2021-01-26 08:58【

材料与方法


电热鼓风干燥箱(DHG-9075A)、电热恒温水浴锅 (HWS-24):上海一恒科学仪器有限公司;电子天平 (AUX320):日本岛津公司;超声波清洗器(KQ-500V): 昆山市超声仪器有限公司;低速离心机(TD-6):长沙 湘智离心机仪器有限公司;循环水式真空泵[SHZ-D (Ⅲ)]、旋转蒸发仪(YRE-5299):巩义市予华仪器有限责任公司;恒温培养振荡器(HNY-200B):天津市欧诺 仪器仪表有限公司。采用 FRAP 法按照 T-AOC 试剂盒说明书检测总抗 氧化能力,分别取浓度为 0.15、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mmol/L 的FeSO·4 7H2O 标准溶液 5 μL,各加入 180 μL FRAP 工 作液,混匀后 37 ℃孵育 4 min,测定其 OD593 nm。以 FeSO4 浓度(μmol/L)为横坐标,OD593 nm 为纵坐标,绘制 FRAP 测定标准曲线[18]。根据测得的杨桃多酚提取液质量浓 度,将其稀释为 10、20、30、40、50、60 μg/mL,同时以等 浓度的抗坏血酸作阳性对照。用移液器取 5 μL 溶液, 加入 FRAP 工作液 180 μL,混匀后 37 ℃孵育 4 min,测 定其 OD593 nm。

巩义予华YRE-5299型旋转蒸发器


结果与分析


采用没食子酸作为总多酚测定的标 准物质时,其在 765 nm 处的吸光度 OD765 nm 与其浓度 呈良好的线性关系。测定杨桃多酚提取液的吸光度 值,根据以上没食子酸标准曲线的回归方程,可得杨 桃多酚提取液的浓度为 5.2 mg/mL。后续总抗氧化能 力、羟自由基清除能力及 DPPH 自由基清除能力试验 中所使用的杨桃多酚提取液均是以此浓度杨桃多酚 提取液稀释一定倍数得到的溶液。当体积为 1.5 mL 时抗坏血酸对羟自由基的清除率达 99%以上,羟自由 基基本已被清除。在研究的体积范围内,随着杨桃多 酚提取液体积的增加,羟自由基清除率逐渐增加,最 高可达 90%以上,说明杨桃多酚提取液有良好的自由 基清除能力。此外,同一质量浓度条件下,杨桃多酚提 取液清除羟自由基的能力均低于相同浓度的抗坏血 酸溶液。